Лактобациллы реутери что это

Во всем мире выпускаются многочисленные пищевые продукты и напитки, содержащие L. reuteri, а также таблетки, пастилки, жевательные резинки, масляные капли и специальные напитки.

Определение

Существует несколько определений пробиотиков. В наибольшей мере, учитывая результаты проведенных в последние десятилетия исследований, соответствует следующее определение:

Критерии

Штаммы пробиотиков должны соответствовать следующим требованиям:

Пробиотики подавляют патогенные микроорганизмы с помощью следующих механизмов:

Действие пробиотиков на основе L. reuteri

Наиболее явное влияние пробиотики оказывают на диарею, что проявляется уменьшением как ее длительности, так и выраженности симптомов [6,7]. Отмечена эффективность пробиотиков при ротавирусных инфекциях у детей, антибиотик-ассоциированной диарее, диарее путешественников. В недавно завершенном исследовании установлена необходимость применения пробиотиков в ранние сроки для достижения оптимального эффекта у детей при острых инфекционных заболеваниях кишечника. Так, при введении пробиотиков не позже чем через 60 ч после появления первых симптомов заболевания отмечено достоверное уменьшение его продолжительности и длительности лечения в стационаре [8]. Из других болезней и нарушений, при которых достигнуты многообещающие результаты применения пробиотиков, отмечены воспалительные заболевания кишечника, синдром раздраженного кишечника, инфекция Helicobacter pylori, аллергические реакции у детей. Благоприятные результаты достигнуты и при нарушениях микрофлоры полости рта и женских половых органов [6,9]. Кроме того, предполагают, что применение пробиотиков способствует улучшению состояния пациентов после проведения лучевой терапии и химиотерапии рака, при артрите, кистозном фиброзе.

Оптимизация функции стенки кишечника

У людей и животных обнаружены некоторые общие реакции при применении пробиотиков на основе L. reuteri, которые касались физического барьера стенки кишечника и иммунных реакций организма. Также крайне важно влияние пробиотиков на другие виды нормальной микрофлоры кишечника. Влияние на рост и поглощение питательных веществ обусловлено укреплением определенных структур кишечника, в частности, ворсинок.

Приводим примеры таких общих реакций [1, 10,11]

Пробиотические микроорганизмы

Молочнокислые бактерии (лактобактерии)

Общей особенностью всех молочнокислых бактерий (лактобактерий) является продуцирование молочной кислоты как конечного продукта переработки (ферментации) Сахаров и сложных углеводов пищи. Группу лактобактерий образуют несколько родов, в частности рода Lactobacillus, Enterococcus, Streptococcus, Lactococcus.

Систематизация и классификация

Принадлежность тех или иных видов микроорганизмов к определенному роду устанавливают на основании определенных общих свойств, например, морфологии, способа ферментации, биохимических характеристик.

Для понимания различия между разными видами и штаммами бактерий приводим подобную классификацию.

Род Lactobacillus включает примерно 90 видов с широким спектром стенотипических, биохимических и физиологических свойств. Каждый вид состоит из определенных штаммов, выделенных из разных источников, например, из организма человека, растений или пищевых продуктов. При исследовании иммунологических эффектов пробиотиков отмечены специфические эффекты у каждого штамма [13].
Систематизация бактерий постоянно меняется, поскольку генетические технологии позволяют более точно их классифицировать [14]. Примером такого процесса является группа бактерий L. acidophilus. Сегодня достаточно трудно оценить результаты исследований эффекта пробиотиков, в которых указаны лишь род и вид микроорганизмов, но нет сведений о штамме культуры.

Виды Lactobacillus

Лактобациллы распространены по всему ЖКТ, наибольшее количество их содержится в желудке и тонком кишечнике. Также они населяют толстый кишечник, но не в таком большой количестве, как доминирующие там микроорганизмы.
Наиболее полно изученным эффектом пробиотиков является влияние на диарею различной этиологии у детей и взрослых. Применение пробиотика позволяет уменьшить риск появления диареи, а также продолжительность и выраженность уже возникших симптомов [6,7].

Другие пробиотики

Интерес для исследований пробиотиков также представляют дрожжи Saccha-romyces boulardii. Однако у них отсутствует способность колонизировать стенку кишечника. Отмечен клинический эффект при антибиотик-ассоциированной диарее и Clostridium difficile [15].

Кроме того, в состав пробиотических пищевых продуктов и препаратов включают определенные виды Bifidobacterium как самостоятельно, так и в сочетании с лактобациллами. Этот род исключительно анаэробных микроорганизмов доминирует в толстом кишечнике.

Бифидобактерии и лактобациллы являются первыми представителями микрофлоры, колонизирующими ЖКТ у новорожденных, в дальнейшем они облегчают развитие других видов нормальной микрофлоры.

Lactobacillus reuteri История Lactobacillus reuteri (L. reuteri) относительно недавно выделены в самостоятельный вид рода Lactobacillus, и включают штаммы, которые до 1980 г. относили к классу L. fermentum (II биотипа) [16]. Изучая наиболее оптимальные штаммы L. reuteri у человека, специалисты компании «БиоГая АБ» исследовали места, где люди живут в гармонии с природой. Первый штамм L. reuteri выделен в 1990 г. из грудного молока женщин Перу, живущих в Андах. Этот штамм передан на хранение в Американскую коллекцию типов культур (АТСС) под названием Lactobacillus reuteri SD 2212 (SD означает ответственное хранение), в дальнейшем ему присвоен код АТСС 55730. Коммерческое название штамма Lactobacillus reuteri Protectis.

В настоящее время в коммерческих целях применяют и другие штаммы лактобактерий человека (см. раздел «Здоровье полости рта»).

Морфология

Бактерии Lactobacillus reuteri представляют собой грамположительные палочки неправильной формы с закругленными концами. Они располагаются по отдельности, парами и небольшими кластерами.

Естественная среда обитания

Естественной средой обитания Lactobacillus reuteri является ЖКТ людей и животных. Это один из немногих видов пробиотиков индигенной микрофлоры, разрешенных к промышленному применению, эти бактерии одни из первых колонизируют кишечник новорожденных [17].

У людей эти бактерии выделили из следующих источников: [17, 18]

В проведенных в начале 60-х годов исследованиях установлен высокий уровень колонизации ЖКТ культурами L. reuteri и Lactobacillus [19, 20].

Однако по данным недавно проведенных исследований отмечено существенное уменьшение частоты колонизации видами Lactobacillus новорожденных Швеции и резкое уменьшение общей колонизации Lactobacillus. Кроме того, оказалось, что у детей Швеции колонизация Lactobacillus хуже, чем у новорожденных Эстонии [21].

Ухудшение ситуации с колонизацией Lactobacillus объясняют современными изменениями образа жизни, в частности, неправильным питанием и «избыточной» гигиеной, которые связывают с более высокой частотой аллергических заболеваний у детей Западной Европы по сравнению с таковой в Восточной Европе.

L. reuteri в грудном молоке

По данным проведенного компанией «БиоГая АБ» в 2001 г. исследования, в Дании, Израиле, Японии, Перу, Южной Африке, Южной Корее и Швеции L. reuteri в грудном молоке обнаружена в среднем у 12% кормящих женщин (диапазон 0-50%). Наиболее часто лактобактерии выявляли у жительниц сельских районов Японии и Швеции [22].

Жизнеспособность

L. reuteri способна сохранять жизнедеятельность в присутствии хлористоводородной кислоты желудка, желчи и пищеварительных ферментов верхнего отдела тонкого кишечника 24.

Также отмечена превосходная способность ее закрепления и колонизации во всех отделах ЖКТ. Эти свойства необходимы для обеспечения пробиотической активности микроорганизмов.

С использованием различных тестов подтверждена высокая надежность промышленного штамма АТСС 55730. Так, G. R. Gibson и соавторы сравнивали показатели выживания 32 штаммов в проведенном в Великобритании исследовании с моделированием условий ЖКТ. В желчи выжили лишь 6 штаммов.

Физиология

Некоторые противомикробные свойства

Вместе с тем, уксусная кислота обладает ингибирующей активностью в отношении дрожжей, грибов и других видов микроорганизмов. Некоторые вещества, вырабатываемые L. reuteri, в частности углекислый газ и перекись водорода, оказывают противомикробное действие на патогенные микроорганизмы.

L. reuteri является единственным видом Lactobacillus, способным синтезировать такое противомикробное вещество, как реутерин.
Реутерин обладает широким спектром активности в отношении различных микроорганизмов, а также грибов, дрожжей и простейших [28].

Другие противомикробные вещества

Стимулирование кишечника

При исследовании эффектов L. reuteri отмечено ингибирование патогенных микроорганизмов при отсутствии влияния на обычную микрофлору кишечника. Ингибиторные и укрепляющие свойства в отношении микрофлоры выявлены в исследованиях у людей и животных [ 18, 23, 24, 33].

Микроорганизмы, обитающие на стенках ЖКТ, обмениваются с эпителиальными клетками различными химическими сигналами, обусловливают те или иные иммунные реакции. Патогенные микроорганизмы вырабатывают сигналы, которые облегчают им доступ к эпителиальным клеткам, а пробиотики стимулируют защитные иммунные реакции, в частности, выделение в просвет кишечника антител и синтез различных про- и противовоспалительных цитокинов.

Влияние L. reuteri на организм человека

По данным 108 клинических исследований, в которых участвовали 8599 человек (июль, 2013), о применении Lactobacillus reuteri АТСС 55730 (предыдущий код SD2112):

Влияние на организм животных

При исследовании действия Lactobacillus reuteri (специфических штаммов хозяев и/или АТСС 55730) на подопытных отмечены следующие дополнительные эффекты:

На основании анализа результатов клинических исследований компанией «БиоГая АБ» установлена эффективность и безопасность для людей дозы 100 млн (10s) колониеобразующих единиц (КОЕ) L. reuteri АТСС 55730 в сутки. Хотя культура L. reuteri входит в состав резидентной микрофлоры человека, указанная доза обеспечивает адекватный и стабильный уровень L. reuteri в ЖКТ 60.

Безопасность

Лактобактерии характеризуются превосходным профилем безопасности, на основании анализа опыта их применения не обнаружены какие-либо существенные проблемы с безопасностью.

Лактобактерии применяют в пищевой промышленности в течение многих лет. Их используют в многочисленных процессах ферментации пищевых продуктов, они играют важную экологическую роль в консервации пищи.

Безопасность лактобактерии

Как показали многочисленные данные по оценке безопасности лактобактерий, они полностью безопасны для людей [62].

Недавно вопрос безопасности пробиотиков исследовали специалисты из Финляндии. Установлено, что, несмотря на значительное увеличение потребления пробиотических продуктов в Финляндии за последние 15 лет, какие-либо серьезные побочные реакции, которые имели бы связь с видами Lactobacillus, не отмечены [63]. В аналогичном исследовании, проведенном в Швеции, получены похожие результаты [64].

Безопасность L. reuteri

Lactobacillus reuteri АТСС 55130 выпускают в форме про биотических молочных продуктов, таблеток, масляных капель и специальных напитков. Все эти формы обеспечивают суточную дозу 100 млн (10 8 ) КОЕ L. reuteri.

Пробиотик компании «БиоГая АБ» широко применяется у детей грудного и младшего возраста. Стационары, включая детские и взрослые отделения интенсивной терапии, заказывают большое количество таких продуктов. При столь широком применении ни в научной литературе, ни в отчетах медицинских организаций нет упоминаний о каких-либо нежелательных клинических проявлениях или побочных реакциях, связанных с применением L. reuteri АТСС 55130 [65].

Исследование безопасности L. reuteri

В ряде исследований подтверждена безопасность применения L. reuteri АТСС 55130 у лиц всех возрастов, включая недоношенных и пациентов с ослабленным иммунитетом (ВИЧ-инфицированные). При сравнении с группами плацебо не обнаружено каких-либо клинически важных различий безопасности или переносимости при применении L. reuteri [37, 38, 47, 6, 66-71, 72-75].

Некоторые авторы сообщили лишь о слабо выраженном и быстро проходящем метеоризме [66].

Недавно опубликованы результаты исследования, в котором недоношенным детям в отделении интенсивной терапии назначали L. reuteri АТСС 55130. В этой популяции детей при высокой восприимчивости к инфекциям L. reuteri АТСС 55130 одинаково безопасны по сравнению с контрольной группой [75].

Высказывались опасения, что включение в состав детского питания пробиотических микроорганизмов, продуцирующих D(-)-молочную кислоту, теоретически может обусловить повышение уровня D(-)-молочной кислоты в крови. Однако пока ни в одном отчете нет данных об изменении уровня D(-)-молочной кислоты у здоровых лиц любого возраста, в частности, при применении микроорганизмов, продуцирующих D(-)-молочную кислоту [76].

Источник

Уменьшение количества Helicobacter pylori с помощью Lactobacillus reuteri DSMZ17648

Lactobacillus reuteri DSMZ17648 специфически коагрегирует с Helicobacter pylori in vitro и сохраняет активность даже после лиофилизации. Оценена потенциальная возможность снижения уровня обсемененности H. pylori у здоровых, но инфицированных взрослых люде

Lactobacillus reuteri (L. reuteri) DSMZ17648 specifically co-aggregates H. pylori in vitro and was shown to reduce 13C urea breath test in vivo. In this pilot study, we tried to replicate previous findings in an independent sample and to evaluate effects of spraydrying vs. freeze-drying of cultures. A single-blinded, placebo-controlled study was done in 22 H. pylori positive, asymptomatic adults.

Несмотря на то, что в течение длительного времени считалось, что микроорганизмы не выживают в желудке, Helicobacter pylori (H. pylori) регулярно обнаруживают у пациентов с язвенной болезнью. Она выделяет фермент уреазу, с помощью которого разрушает (гидролизует) мочевину, в результате чего образуется аммиак. Этот механизм в сочетании с подвижностью бактерии и способностью прикрепляться к слизистой оболочке позволяет ей выживать в кислой среде желудка. Присутствие и воздействие H. pylori связывают с несколькими заболеваниями желудочно-кишечного тракта, включая язвы и рак желудка [1]. У инфицированных людей концентрация H. pylori составляет приблизительно от 10 4 до 10 7 колониеобразующих единиц (КОЕ) на грамм слизистой оболочки желудка [2]. Инфицирование H. pylori может привести к воспалительной реакции, увеличению объема вырабатываемой желудочной кислоты и гастритам типа B. Очевидна зависимость между уровнем колонизации желудка H. pylori и вероятностью появления симптомов/обострения заболевания [3]. При нормальной барьерной функции слизистой оболочки желудка инфицирование H. pylori часто приводит только к небольшому сопутствующему воспалению. В случае хронического проявления могут образовываться хронические опухоли, о чем свидетельствует лимфома MALT-типа [4]. Лечение первичной инфекции оказывает терапевтический эффект на вторичные заболевания.

Генетические факторы риска также влияют на патологические процессы при инфицировании H. pylori [5–7]. Исследования семей и близнецов позволяют предположить наличие взаимосвязи между вероятностью инфицирования и генотипом. Более того, реакция на инфекцию частично передается по наследству, это второй важный фактор риска для здоровья. Способность справляться со стрессом как поведенческий фактор риска развития рака желудка также передается по наследству [8]. Так как инфекция очень часто передается от родителей к детям в детстве [9], должна приниматься во внимание комплексная взаимосвязь с генотипом и окружающей средой: дети родителей с генетическими факторами риска могут унаследовать эти генетические факторы риска и в то же время имеют более высокую вероятность инфицирования в связи с повышенным воздействием факторов окружающей среды. Этот замкнутый круг может быть разорван лечением родителей на ранней стадии.

Чтобы уменьшить влияние генетических факторов, настоящее исследование по проверке концепции частично проводилось на близнецах, так как в этом случае генетическая среда контролируется, но основной целью исследования было изучение воздействия Lactobacillus reuteri DSMZ17648 на инфицированных взрослых людей. В настоящее время единственным методом терапевтического лечения инфекции является эрадикационная терапия патогенных микроорганизмов с использованием комбинации блокаторов протонного насоса с несколькими антибиотиками. Этот комплексный подход имеет высокий риск нежелательных лекарственных реакций. Более того, такая терапия рекомендуется при острых гастритах или сильно выраженных симптомах, таких как язва желудка. Поэтому для пациентов, инфицированных H. pylori, но еще не имеющих патологий с клинической точки зрения, на данный момент не найдены средства терапевтического лечения [10]. Рост устойчивости H. pylori к антибактериальным препаратам и увеличивающиеся сроки эрадикационной терапии наглядно свидетельствуют о необходимости разработки альтернативного метода лечения или способов профилактики. Были предприняты попытки повысить эффективность терапии путем добавления приема Lactobacillus acidophilus к стандартной трехкомпонентной эрадикационной терапии, но они не дали каких-либо значимых результатов [11].

Мы выбрали штамм Lactobacillus reuteri DSMZ17648 путем скрининга сотен штаммов Lactobacilli в большой коллекции культур (ORGANOBALANCE GmbH, Берлин, Германия). Этот специфический штамм первоначально был классифицирован как активный фармакологический ингредиент (АФИ), так как он принадлежит к группе L. fermentum. Но так как классификация по АФИ не позволяла дифференцировать L. fermentum и L. reuteri [12], было выполнено секвенирование 16S-rRNA, в соответствии с этим методом штамм DSMZ17648 был классифицирован как L. reuteri. DSMZ17648 специфически коагрегирует с H. pylori in vitro и в искусственном желудочном соке и не оказывает негативного влияния на другие бактерии симбиотической кишечной флоры (Lang и соавт., в препарате). Эти специфические связи закрывают поверхностные структуры H. pylori и снижают подвижность Helicobacter. Предполагается, что связанные патогенные организмы не могут присоединяться к слизистой оболочке желудка и выводятся из него.

Целью разработки специфических лактобакцилл является устранение пробела в средствах терапевтического лечения инфекций, протекающих бессимптомно, а также создание для пациентов нового профилактического средства, понижающего риск развития рака желудка, таким образом можно предотвратить серьезные негативные последствия для здоровья и сократить расходы на лечение.

L. reuteri были обнаружены как в грудном молоке человека, так и в микрофлоре желудочно-кишечного тракта. Было доказано, что штаммы L. reuteri в ряде случаев благоприятно влияют на здоровье, в том числе при коликах у младенцев, желудочных расстройствах у детей и пищевой непереносимости у недоношенных детей [13].

Нами было проведено плацебо-контролируемое исследование для проверки концепции, задачей исследования было определение, может ли лечение препаратом L. reuteri DSMZ17648 (Pylopass™/Lonza)* в течение двух недель понизить уровень обсемененности желудка H. pylori у пациентов, не имеющих симптомов каких-либо заболеваний.

Материалы и методы исследования

Исследуемая популяция

В соответствии с исходными условиями настоящее исследование должно было представлять собой плацебо-контролируемое исследование однояйцевых близнецов, при котором один из близнецов получает активное лечение, в то время как его однояйцевый близнец принимает плацебо-препарат. По имеющимся данным степень соответствия реакции на инфекцию H. pylori у однояйцевых близнецов составляет 80% [7], а у двуяйцевых близнецов — 60%. Наследуемость количественных уровней колонизации H. pylori согласно имеющейся оценке составляет 0,8. Историческая распространенность инфекции H. pylori для основной популяции по имеющимся данным составляет 45%, однако по результатам последних исследований этот параметр уменьшился примерно до 25% в западном мире [14, 15]. Распространенность инфекции в Германии по данным за 1996 г. составляла 39% [16]. В менее развитых регионах распространенность инфекции гораздо выше. На основании этих данных на первом этапе исследования планировалось включить в анализ 64 пары близнецов, ожидалось, что в 29 парах будет хотя бы один зараженный близнец, а в 23 парах близнецы будут иметь одинаковое состояние, то есть оба близнеца в паре будут иметь положительные результаты теста. Так как коэффициент заболеваемости на этапе скрининга оказался ниже ожидаемого в соответствии с данными для всей популяции, в исходный проект были внесены изменения, и в исследование были включены пациенты, не являющиеся близнецами. Во втором этапе скрининга участвовали как близнецы, так и единственные дети.

Пациенты включались в исследуемую группу, если они достигли 18-летнего возраста, подписали документированное информированное согласие, а также имели положительные результаты 13 C-уреазного дыхательного теста на наличие H. pylori (Helicobacter Test INFAI®, Δδ ≥ 4‰). Критерием исключения был прием любых медицинских препаратов, которые могли повлиять на эффективность лактобацилл, имевшие место ранее хирургические вмешательства, влияющие на желудок или тонкую кишку, которые могли повлиять на результаты исследований, например гастрэктомия или обходной желудочный анастомоз, диабеты первого или второго типа, наличие случаев нарушения липидного обмена в семье, любые другие серьезные заболевания, изменение веса на > 3 кг за последние три месяца, беременность или кормление грудью, злоупотребление алкоголем или наркотиками, психиатрические расстройства.

Протокол исследования

Исследуемый продукт (активное вещество) состоял из лиофилизированных мертвых клеток штамма DSMZ17648 в форме твердых таблеток для перорального приема. Каждая таблетка содержала 5 × 10 9 клеток, суточная доза 4 таблетки составляет 2 × 10 10 клеток. Таблетки с пищевой добавкой и плацебо-таблетки имели одинаковый вес (250 мг), размер, цвет и запах.

Среди пар, где оба близнеца инфицированы, лечение было рандомизировано параллельно в течение периода, составлявшего 14 дней. Среди единственных детей активное лечение и лечение плацебо-препаратом распределялось по методу одностороннего слепого нерандомизированного перекрестного исследования. На первом этапе в течение 14 дней принимались плацебо-таблетки; после второго дыхательного теста в течение 14 дней осуществлялось активное лечение, затем снова проводился дыхательный тест. В течение четырех-шести недель после этапа лечения проводился еще один дыхательный тест.

Пациентам были даны инструкции принимать по две таблетки после завтрака и ужина. Пациенты также были проинструктированы о том, что в течение периода лечения не следует изменять образ жизни и диету и что они не должны употреблять пищевые продукты с пробиотиками и клюкву.

Пациентов попросили заполнить анкету по вопросам, связанным с исследованием, чтобы документировать самочувствие, наличие каких-либо потенциальных нежелательных лекарственных реакций, курение, употребление алкоголя, принимаемую пищу и медикаменты.

Измерения

Выявление инфекции H. pylori на этапе скрининга и количественное определение степени колонизации для проверки эффективности DSMZ17648 выполнялись путем проведения дыхательного теста, так как этот метод диагностики лучше всего подходит для определения интраиндивидуальных изменений [17]. Исследование Helicobacter Test INFAI® — это дыхательный тест для прямого неинвазивного количественного обнаружения бактерии H. pylori [14]. В основе теста лежит уреазная активность H. pylori. Специфичность (98,5%) и чувствительность (97,9%) теста Helicobacter Test INFAI® сравнимы с традиционными неинвазивными методами диагностики (эндоскопия или биопсия). Так как дыхательный тест отражает текущую степень колонизации H. pylori, он хорошо подходит для определения уменьшения концентрации или уничтожения бактерий.

Тест основан на гидролизе мочевины, меченной изотопом 13 C, с образованием аммиака и диоксида углерода, меченного изотопом 13 C, который обнаруживают в выдыхаемом воздухе. Пациент проглатывает 75 мг мочевины, обогащенной изотопом 13 С. Диоксид углерода, образующийся при распаде мочевины, содержащей изотоп, может быть обнаружен методом массспектроскопии. Так как даже в отсутствии уреазной активности в выдыхаемом воздухе присутствует небольшое количество 13 C, образующихся естественным путем, пробы выдыхаемого воздуха берутся до и через 30 минут после проглатывания мочевины, меченной изотопом 13 C. Если значения одинаковые, результаты теста считаются отрицательными, что свидетельствует о том, что человек не инфицирован H. pylori. Установлено количественное соотношение между уреазной активностью и содержанием 13 C в выдыхаемом воздухе, которое косвенно отражает уровень колонизации H. pylori.

Статистика

Все исторические и клинические данные были введены в специальную экспериментальную базу данных, анализ выполнялся с помощью SPSS (версия 16.0.2). Мы рассчитали отличие значения результатов 13 C-уреазного дыхательного теста (УДТ) от результатов исходных измерений: ΔАктивный = 13 C УДТ активный — 13 C УДТ исходный, Δ Плацебо = 13 C УДТ плацебо — 13 C Статистический УДТ исходный, ΔВымывание = 13 C УДТ вымывание — 13 C УДТ исходный. Дополнительно сравнивались абсолютные значения результатов теста на различных этапах исследования: 13 C УДТ исходный, 13C УДТ активный (через 14 дней активного лечения), 13 C УДТ плацебо (через 14 дней принятия плацебо-таблеток), 13 C УДТ вымывание (через 4–6 недель после активного лечения). Данные для пар близнецов были скомбинированы и проанализированы как для единственных детей. Метод контроля при работе с однояйцевыми близнецами сравним с перекрестным методом, но без каких-либо потенциальных эффектов переноса. Не использовался рандомизированный порядок активного лечения/плацебо, так как никакого долгосрочного плацебо-эффекта не ожидалось.

Для всех данных было проверено отклонение от нормального распределения с помощью критерия Колмогорова–Смирнова. Стандартные отклонения были проверены парным t-критерием. Потенциальные взаимосвязи между реакцией на лечение и исходным уровнем колонизации были исследованы с использованием линейной регрессии. В качестве порога значимости был задан уровень погрешности 5%. Результаты приведены в виде среднего значения ± стандартное отклонение (СО); значения соответствуют стандартной ошибке среднего значения (СОС).

Результаты

В скрининге принимали участие 364 пациента, из них 47 пар близнецов; 27 пациентов имели положительные результаты дыхательного теста, что является признаком инфицирования H. pylori. Более подробные данные о скрининге популяции приведены в табл.

На начальной стадии было начато всего 14 независимых курсов лечения без пропусков во время начальной стадии испытаний. Все 6 пар близнецов с одинаковым состоянием здоровья согласились участвовать в начальной стадии испытания, также участие приняли 4 близнеца из пар, где был инфицирован только один близнец, и 4 пациента, являющиеся единственными детьми. Так как наблюдалась высокая межиндивидуальная вариабельность количественных показателей колонизации ( 13 С УДТ Исходное), анализ снижения содержания H. pylori при приеме DSMZ17648 выполнялся на основании внутрииндивидуальных изменений после активного лечения или плацебо-лечения (сравнение ΔАктивный с ΔПлацебо). Прием плацебо-препарата не привел к значимому снижению 13 С УДТ (ΔПлацебо — 0,6 ± 5,3), в то время как после активного лечения значения 13 С УДТ уменьшились (ΔЛекарственный препарат — 4,9 ± 7,8, p = 0,026 по сравнению с плацебо), что свидетельствует об уменьшении обсемененности H. pylori. Абсолютные значения 13 C УДТ при измерении на исходном этапе, после плацебо-лечения и после активного лечения составили 14,1 ± 9,9, 12 ± 7,2 (незначимые по сравнению с исходным этапом) и 11,9 ± 5,9 (p относительно исходного значения 0,01, p относительно плацебо 0,03) соответственно.

Чтобы более подробно изучить реакцию на прием DSMZ17648, индивидуальные значения 13 C УДТ были нанесены на график, показанный на рис. 1. После активного лечения у большинства пациентов было зафиксировано снижение степени колонизации H. pylori. Реакции на прием препарата имели некоторую вариабельность: от отсутствия снижения до разницы значений более 20. Для сравнения, после 2 недель плацебо-лечения у некоторых пациентов результаты теста снизились, в то время как у других увеличились на такое же значение, что свидетельствует об отсутствии систематического эффекта.

Значения 13 C УДТ после вымывания (х ± y) незначительно отличаются от значений для активного лечения. Эффект снижения уровня колонизации сохраняется после активного лечения. Повышенная вариабильность значений на этапе вымывания по сравнению со значениями после активного лечения, скорее всего, отражает биологическую вариабельность процесса роста бактерий.

Наблюдается некоторая зависимость реакции на лечение от исходных значений (r 2 = 0,66, p = 0,01, рис. 2). Чем выше уровень колонизации, тем более ярко выражен эффект снижения уровня колонизации при приеме L. reuteri DSMZ17648. При очень низких исходных значениях эффект отсутствует или выражен в очень слабой форме, в отличие от пациентов с очень высоким уровнем колонизации инфекции, поэтому наиболее вероятно, что лечение окажется для них эффективным. При плацебо-лечении была выявлена эта же зависимость, но в меньшей степени (r 2 = 0,35, p = 0,02), возможно, это отражает эффект регрессии к среднему значению. Не исключен прямой плацебо-эффект на иммунную реакцию. Этот потенциальный эффект значительно ниже, чем специфическое действие DSMZ17648.

В соответствии с данными анкет в течение времени проведения исследования не было изменений образа жизни, например, физической активности или диеты, и общего состояния здоровья. Ни в одной из исследуемых групп не было сообщений о каких-либо нежелательных лекарственных реакциях.

Обсуждение

Настоящее исследование in vivo показало существенное снижение уровня колонизации желудка H. pylori после приема Lactobacillus reuteri DSMZ17648 здоровыми пациентами из основной популяции, у которых было выявлено инфицирование H. pylori. Основным критерием оценки было снижение количества H. pylori, измеренного с помощью 13 C-уреазного дыхательного теста (Helicobacter Test INFAI®) через 14 дней приема пищевой добавки, содержащей L. reuteri DSMZ17648, ежедневная доза составляла 2 × 10 10 нежизнеспособных лиофилизированных клеток.

Эти результаты являются серьезным основанием для предположения, что употребление DSMZ17648 может использоваться для профилактики развития вторичных заболеваний и соответствующих симптомов при инфицировании H. pylori. В будущем для подтверждения полученных результатов должны быть проведены более масштабные клинические исследования. В качестве первого этапа этих исследований будут изучены временные сроки снижения количества бактерий и восстановления бактерий после завершения лечения. Учитывая взаимосвязь между инфекцией H. pylori и нервно-психическим напряжением, кратковременное снижение количества бактерий может использоваться в периоды высокого эмоционального стресса, например, во время экзаменов, в периоды повышенной нагрузки на работе или при других психологических переживаниях.

В ходе настоящего исследования снижение количества бактерий было наиболее ярко выражено у пациентов с высоким уровнем инфицирования, в то время как у пациентов с более низкими результатами дыхательного теста (близкими к порогу обнаружения) статистически значимое снижение количества H. pylori не было зафиксировано. Однако при таких низких уровнях инфицирования длительный прием L. reuteri DSMZ17648 может также быть эффективным. Мы предполагаем, что уничтожение или замедление роста количественных показателей инфицирования может использоваться в качестве средства профилактики, что должно быть проверено в ходе более длительных наблюдений.

В предыдущих исследованиях, посвященных оценке эффективности применения широкого ряда культур пробиотиков для лечения H. pylori, были получены различные результаты. Исследование с применением L. casei показало незначительный подавляющий эффект [19]. При использовании живых клеток штамма L. brevis было зафиксировано снижение и было выдвинуто предположение о корреляции с уменьшением синтеза полиамина [20]. В случае с L. acidophilus (johnsonii) La1 было выявлено, что использование супернатанта на основе молочной сыворотки приводит к значительному снижению результатов дыхательных тестов на H. pylori, как в сочетании с омепразолом, так и без него [21].

Были выдвинуты предположения о нескольких потенциальных возможных механизмах влияния пробиотиков на H. pylori. Неиммунологический барьер является первой линией защиты от патогенных бактерий. Прием пробиотиков может усилить этот барьер за счет генерации противомикробных веществ, конкурентной борьбы с H. pylori за адгезивные рецепторы, стимуляции производства слизистого секрета и стабилизации барьера слизистой пищеварительного тракта. Противомикробное действие может объясняться не только прямым воздействием на H. pylori, но и снижением ее уреазной активности [22].

Для проявления всех этих противомикробных свойств требуются живые микроорганизмы, в то время как препарат DSMZ17648 содержит нежизнеспособные клетки, что значительно снижает вероятность потенциальных нежелательных лекарственных реакций и, следовательно, обеспечивает стабильную активность в потенциальных потребительских товарах и в составе фармацевтических и медицинских препаратов. L. reuteri DSMZ17648 имеет много потенциальных областей применения. Так как они снижают бактериальную обсемененность, они могут использоваться как для смягчения проявления острых симптомов, так и для кратковременной профилактики в периоды высокой эмоциональной нагрузки. L. reuteri DSMZ17648 также может использоваться для долговременной профилактики при хронических заболеваниях. Несмотря на то, что снижение уровня обсемененности H. pylori все еще наблюдалось через 4–6 недель после лечения, более подробный анализ эффективного периода, а также зависимости эффекта от дозы не входил в задачи настоящего исследования и должен быть изучен отдельно.

Литература

* HealthTwiST GmbH, Берлин, Германия
** Экспериментально-исследовательский клинический центр, Charité Campus Berlin-Buch (CCB), Берлин, Германия
*** ORGANOBALANCE GmbH, Берлин, Германия
# Institut für Klinische Pharmakologie, Medizinische Hochschule Hannover, Ганновер, Германия

* В РФ продукт, содержащий субстанцию Pylopass™/Lonza, зарегистрирован как Хелинорм®.

Источник

• ← Лактобациллы превалируют что это
• Лактобациллы скудные что это значит →