Лазерный хетчинг эмбрионов что это
Хетчинг – процедура, которая помогает эмбриону «вылупиться из яйца»
В каких ситуациях эмбриону нужно делать вспомогательный хетчинг и каковы риски процедуры читайте в статье врача-репродуктолога А.В. Рифатовой и врача-эмбриолога М.В. Арефьевой.
Современная медицина не стоит на месте и, к счастью, происходит процесс улучшения качества медицинской помощи. Это относится и к вспомогательным репродуктивным технологиям (ВРТ). Так, например, развиваются новые методики, призванные повысить эффективность ВРТ, а, значит, за этим последует увеличение рождаемости. Одна из этих методик – хетчинг, который вызывает много вопросов пациентов.
Что же такое вспомогательный хетчинг (от англ. to hatch out, что означает «вылупиться из яйца») и кому он нужен, разберемся в данной статье. Развитие эмбриона по истине процесс удивительный, ведь после слияния двух клеток (яйцеклетки и сперматозоида) происходит великое множество процессов прежде, чем родится человек.
Оболочка, которая сберегает эмбрион в первые дни
С момента образования зиготы до стадии бластоцисты (первые 5 дней развития) эмбрион окружен в блестящую прозрачную гликопротеиновую оболочку. Эта оболочка выполняет роль «защитной скорлупы», обеспечивает поступление питательных веществ эмбриону и позволяет уберечь его от механических повреждений. В процессе деления клеток под действием особых природных механизмов и специальных веществ эта защитная оболочка истончается и разрывается, как правило, на 5-7 сутки деления, когда эмбрион достигает
крупного размера (Рис.1). Так происходит своеобразное «вылупление» эмбриона, он выходит из этой оболочки и далее имплантируется в стенку матки (в эндометрий) и продолжает свое развитие, которое длится около 265-270 дней.
Рис. 1. Истончение блестящей оболочки, прорыв и выход эмбриона из блестящей оболочки
Если эмбрион не может вылупиться в пробирке
Так происходит в норме. Однако, есть ситуации, когда как в естественной жизни, так и «в пробирке» этот процесс идет с некоторыми отклонениями и эмбрион не может
«вылупиться» из твердой утолщенной оболочки.
Для решения данной проблемы был изобретен вспомогательный хетчинг, когда эмбриолог проводит искусственную надсечку блестящей оболочки эмбриона в лабораторных условиях. Это позволяет повысить вероятность наступления и прогрессирования беременности.
Методики проведения хетчинга оптимизируются и усовершенствуются. И на сегодняшний день самыми современными вариантами являются лазерный и механический хетчинг.
Наиболее популярный метод — лазерный хэтчинг, при нем выполняется надсечение блестящей оболочки несколькими тонкими лучами лазера (Рис. 2а). При механическом хетчинге производят механическое воздействие на блестящую оболочку специальной микроиглой дважды под определенным углом (Рис. 2б). При обоих методах формируется узкая прорезь, что позволяет бластоцисте скорее выйти из своей «скорлупы». В Клинике Нуриевых на сегодняшний день применяются оба этих метода.
а) 
б) 
Рис. 2. Техники проведения хетчинга.
а) лазерный хетчинг; б) механический хетчинг
Кому рекомендован хетчинг
Однозначен ответ – данная процедура показана далеко не всем пациентам. Многочисленные исследования показали отсутствие увеличения эффективности от этой процедуры у женщин с хорошим прогнозом. Значит, проводить эту процедуру им нет необходимости.
Риски хетчинга
Хетчинг считается достаточно безопасной процедурой, однако бывают единичные случаи повреждения эмбриона при этой манипуляции. Есть исследования, которые показывают, что после хетчинга увеличивается риск появления однояйцевых близнецов.
Поэтому данную процедуру, впрочем, как и любые другие, делают строго по показаниям. Решение о проведении хэтчинга принимает эмбриолог и лечащий врач. Пациентам необходимо находиться на связи с клиникой. Не удивляйтесь, если Вам позвонит эмбриолог в день переноса и скажет о необходимости проведения хетчинга, ведь о некоторых показаниях можно судить только в этот день.
Мы желаем всем благополучной беременности и рождения здоровых детей!
Надо ли делать вспомогательный хэтчинг? Кому и когда?
Очень часто пациенты интересуются надо ли им делать вспомогательный хэтчинг. Давайте разбираться надо ли, кому и когда?
Во время эмбриологического этапа в клинике эмбрион проходит несколько стадий за время культивирования в инкубаторе – от ооцита в день пункции, через зиготу на следующий день, стадии дробления бластомеров на 2-3 сутки культивирования, морулу на 4 день и к ожидаемой бластоцисте на 5 день. И на всех этих стадиях эмбрион надежно защищен от внешних воздействий блестящей оболочкой – белковой структурой, образованной самим ооцитом еще во время созревания в фолликуле. Эта оболочка выполняет две доказанные функции – обеспечивает «блок полиспермии», то есть не дает проникнуть в яйцеклетку более одного сперматозоида и удерживает рядом друг с другом бластомеры на стадии дробления. На 5-7 сутки эмбрион достигает крупного размера, блестящая оболочка истончается и рвется – эмбрион вылупляется (хэтчинг). Однако эмбрион разрывает блестящую оболочку не только за счет своего размера, он так же выделяет литические ферменты для разрушения белков оболочки. Так происходит в идеале. На деле, часто случается, что эмбрион не может прорвать твердую оболочку и остается в ней — имплантация не происходит( Вот тут и возникает вопрос — может быть надо помочь эмбриону выбраться из оболочки? Вопрос так и остается дискуссионным. А способ придуман давно и методика с каждым годом совершенствуется.
Группы пациентов, которым показан вспомогательный хэтчинг в наше время: возраст женщины больше 40, повышенный уровень ФСГ и утолщенная блестящая оболочка. Во всех этих случаях не только блестящая оболочка уплотнена, но и нарушен у эмбриона синтез литических ферментов, помогающих ее разрушать. До сих пор многие клиники стараются сделать хэтчинг эмбрионам после криоконсервации. Однако уже накоплены исследования неэффективности хэтчинга при этом.
Способов проведения хэтчинга несколько: химический — сейчас применяется редко из-за доказанного вреда для эмбриона малейших нарушений методики проведения; механический — до сих пор часто применяемая технология, в хороших руках дающая положительные результаты. И на данный момент наиболее популярный метод — лазерный хэтчинг, или надсечение блестящей оболочки несколькими тонкими лучами лазера. У всех этих методик есть один общий недостаток — разрыв или удаление небольшого куска оболочки, дальше бластоциста сама должна выбраться из «скорлупы». Бывают бластоцисты, которые так и не начинают вылупление, описаны случаи различных повреждений эмбрионов при затянувшемся процессе выхода из надорванной оболочки.
Но, прогресс неумолим, Вы согласны? Сейчас разрабатываются методики полного удаления блестящей оболочки перед переносом эмбрионов, тем самым позволив ему не тратить время на вылупление, а преступить сразу к имплантации. Применение данного метода действительно может решить все задачи вспомогательного хэтчинга, но применима только для стадии бластоцисты.
Автор статьи: эмбриолог Клиники «Мать и дитя» Юго-Запад М.К. Леонтович
Что такое вспомогательный хетчинг эмбрионов в процедуре ЭКО?
Автор статьи Госсен Валерия Александровна Врач акушер-гинеколог, врач-репродуктолог, УЗ-диагност
Несмотря несомненные успехи методов вспомогательной репродукции, до сих пор актуальны вопросы повышения эффективности ЭКО. Статистические данные не так радужны, как хотелось бы. Так, беременность наступает только у 30-35% женщин, которым проводилось ЭКО, и только у 25% она заканчивается рождением ребенка.
Причины таких различий могут скрываться во многих тонких этапах, от которых зависит результативность программ ЭКО. Поэтому эмбриологи постоянно работают над выявлением таких этапов и разработкой способов преодоления возникающих проблем.
Сегодня поговорим о том, что такое вспомогательный хетчинг при ЭКО. Если кратко, то это искусственное надсечение оболочки эмбриона, которое облегчает его выхождение. Можно сравнить с процессом вылупления цыплёнка из яйца. Хетчинг проводится перед подсадкой эмбриона.
Причины затруднения выхода эмбриона из оболочки
Эффективность процесса оплодотворения зависит от 3 основных составляющих:
После слияния яйцеклетки со сперматозоидом до этапа внедрения в слизистый слой эмбрион покрыт прозрачной оболочкой, которую по-другому называют зоной пеллюцида. Разрыв этой оболочки – это важный этап, который определяет эффективность зачатия, как естественного, так и искусственного.
Однако не все бластоцисты могут осуществить хетчинг. Полный разрыв блестящей оболочки может не состояться, даже несмотря на наличие надрыва. Причиной могут быть следующие факторы:
Об отсутствии хетчинга при попытках самостоятельного зачатия обычно думают, когда беременность не наступает, а расширенное дополнительное обследование не выявляет отклонений. Нарушение тонких механизмов оплодотворения может быть выявлено только с использованием современных молекулярных методов, к которым прибегают при проведении ЭКО.
В гинекологии сейчас приняты четкие временные интервалы, когда допустимо консервативное лечение, направленное на улучшение фертильности. Если же эффекта так и не удается достичь, то следующим шагом является проведение ЭКО, и чем раньше пара проведет искусственное оплодотворение, тем лучше. Это позволит добиться наилучшего результата и избежать критического снижения овариального резерва.
Хетчинг физиологический и вспомогательный
Что такое хетчинг в ЭКО? Это искусственное моделирование физиологических процессов, направленных на успешное зачатие. При самостоятельном зачатии оплодотворенная яйцеклетка по маточным трубам спускается в полость матки (обычно это верхняя треть). В это время инициируется физиологический хетчинг, то есть лизис прозрачной оболочки, который делает возможным прикрепление оплодотворенной яйцеклетки к слизистой матки.
Было установлено, что в лабораторных условиях хетчинг происходит на 5-6-й день с момента слияния женских и мужских хромосом. Этот процесс опосредован 2 основными факторами:
В естественных условиях механизм хетчинга, скорее всего, является более сложным.
Технология хетчинга в ЭКО
Что это хетчинг в программе ЭКО, мы выяснили, а теперь рассмотрим, как же проводится эта процедура. Технология зависит от выбранного метода. В настоящее время наиболее распространенным является лазерный хетчинг. Под большим увеличением микроскопа бесконтактным лазерным диодом проводится лизис прозрачной оболочки. Этот процесс является контролируемым, проводится быстро и точно. Это определеяет высокую безопасность и эффективность метода.
Вспомогательный хетчинг является высокотехнологичным вариантом помощи. Однако иногда может приводить к развитию специфических осложнений. Такими являются:
Методы вспомогательного хетчинга
Вспомогательный хетчинг в криопротоколе и в том же цикле, когда был осуществлен забор яйцеклетки, может проводиться разными способами. Поэтому выделяют следующие разновидности:
Вспомогательный хетчинг повышает эффективность ЭКО, если проводится по показаниям. Объясняется этот факт 3 основными механизмами:
Когда процедуру включают в программу ЭКО?
Сначала врач определяет, нужен ли хетчинг при криопереносе. Если же эта процедура показана, то есть у пары имеются определенные факторы риска, то хетчинг значительно повышает шансы наступления беременности. Такая технология повышения эффективности ЭКО не оказывает ни краткосрочного, ни долгосрочного отрицательного влияния на развитие ребенка. Поэтому при наличии показаний должна проводиться без опаски.
Надо ли делать хетчинг эмбрионов при криопереносе, зависит от возраста, акушерского анамнеза и морфологии яйцеклетки. Основными показаниями к проведению являются:
Надо ли хетчинг эмбрионов при криопереносе, помогут разобраться эмбриолога репродуктивного центра «СМ-Клиника». В нашем Центре установлено современное оборудование, которое позволяет детально оценить состояние прозрачной оболочки, а квалифицированные специалисты проанализируют клиническую ситуацию и объективно оценят наличие показаний. В «СМ-Клиника» выполняются все этапы ЭКО и внедрены инновационные технологии в области репродукции человека, которые позволяют повышать количество наступивших беременностей.
Что такое хетчинг эмбрионов и для какой цели он проводится в процедуре ЭКО?
В современной медицине специалисты добились колоссальных результатов, применяя для лечения бесплодия экстракорпоральное оплодотворение. Но, к сожалению, процент наступления беременности у некоторых категорий пациенток всё ещё невелик. В этой ситуации используют вспомогательный хетчинг.
Считается, что возможной причиной неудачи имплантации эмбрионов в процедуре ЭКО может являться невозможность выхода эмбриона из оболочки, из-за утолщения или затвердевания внешней оболочки эмбриона.
Причины затруднения выхода эмбриона из оболочки
Яйцеклетка человека на разных стадиях развития окружена внеклеточной оболочкой (zona pellucida). В процессе оплодотворения она играет важнейшую роль. На поверхности оболочки расположены рецепторы узнавания сперматозоидов и связывания их с яйцеклеткой.
В дальнейшем зона пеллюцида выполняет защитную функцию, обеспечивая безопасное прохождение эмбриона по маточным трубам. Также благодаря ей на стадии морулы происходит компактизация бластомеров. В стадии бластоцисты можно наблюдать истончение зоны пеллюцида.
Через 120 часов после овуляции происходит хетчинг бластоцисты, то есть освобождение эмбриона от оболочки, а затем и прикрепление его в эндометрий матки.
Совсем недавно специалисты считали, что в процессе хетчинга основную роль осуществляет давление растущей бластоцисты, однако уже доказано, что немаловажную роль играет и маточное окружение.
Следовательно, в лабораторных условиях (in vitro) культивирование эмбрионов, присутствие в культуральной среде ингибиторов протеиназ значительно тормозит хетчинг, а отсутствие в ней некоторых лизинов может привести к затвердеванию зоны пеллюцида. Состав культуральной среды и является первой причиной невозможности освобождения эмбриона от оболочки.
Второй причиной, и самой часто встречаемой у пациенток с диагнозом бесплодие, можно назвать возрастные изменения в организме женщины. У пациенток старшей группы всё чаще специалисты отмечают интенсивное затвердевание зоны пеллюцида, вероятно это обусловлено эндокринными изменениями. По сути, происходит преобразование гликопротеинов в оболочке, что и приводит к повышенной стойкости зоны пеллюцида и невозможности её расщепления под действием литических ферментов. То есть, даже морфологически нормальная бластоциста навсегда остаётся в «заложниках» у оболочки.
В условиях культивирования эмбрионов in vitro эмбриологи довольно часто отмечают ещё одну не менее популярную причину, при которой отсутствует хетчинг – это криоконсервация ооцитов и эмбрионов. В большинстве случаев криоконсервация влияет на молекулярные изменения (гликопротеины) в зоне пеллюцида, что также приводит к её затвердеванию.
Ну и, конечно же, самая сложная и малоизученная причина, при которой отсутствует хетчинг – это гормональные изменения в организме пациентки, связанные с прохождение курса лечения по поводу бесплодия, своего рода замкнутый круг. В первом случае вырабатывающиеся яйцеклетки экспрессируют дефектный лизин, либо же его пониженный уровень, что в сочетании с условиями культивирования in vitro приводит к неспособности эмбриона освободиться от оболочки.
Во втором случае гормональные препараты, назначенные пациентке с целью стимуляции яичников, могут влиять на низкую частоту имплантации эмбрионов. Обусловлено это тем, что наступает асинхронность между развитием эмбриона и днём «Х» (днём имплантации эмбриона в полость матки).
Проще говоря, естественный хетчинг происходит на пятые сутки (примерно через 120 часов) после оплодотворения яйцеклетки. В это же время в эндометрии матки вырабатывается пиноподий, который способствует прикреплению эмбриона в полость матки, и продолжительность его присутствия примерно 48 часов. Следовательно, в естественном нестимулируемом цикле эмбрион может имплантироваться в определённом промежутке времени (окно имплантации от 120 до 168 часов после оплодотворения ооцита).
Если же говорить о стимулируемом цикле, то окно имплантации эмбриона сдвигается, пиноподий присутствует в эндометрии матки от 72 до 120 часов. Соответственно, если хетчинг эмбриона происходит через 120 часов, то у эмбриона практически не остаётся времени для имплантации в полость матки. Это и называется асинхронность между развитием эмбриона и готовностью матки его принять.
Методы вспомогательного хетчинга
Вспомогательный хетчинг – это рассечение зоны пеллюцида. На сегодняшний день уже существует несколько подходов к проведению вспомогательного хетчинга в программе лечения бесплодия.
При помощи микропипетки наносится кислый раствор Тироде на зону пеллюцида, вследствие чего образовывается отверстие диаметром 25 ± 5мкм.
При помощи микроиглы, а также микроманипуляторов производят небольшое рассечение зоны пеллюцида под определённым углом, вследствие чего образуется узкая прорезь.
Применяя пьезоэлектрический микроманипулятор, производятся конические углубления при помощи высокочастотной микровибрации, что приводит к истончению зоны пеллюцида.
При помощи тонкого лазерного луча, бесконтактным путём производят углубления в зоне пеллюцида. Данная методика является самой безопасной и эффективной.
Показания к проведению вспомогательного хэтчинга.
Как говорилось раньше, вспомогательный хетчинг применяют далеко не во всех случаях проведения программы лечения бесплодия. Исследования показали, что по определённым показателям и определённым возрастным группам, применение процедуры вспомогательный хетчинг абсолютно необходимо для достижения высоких результатов. В других же случаях вспомогательный хетчинг либо никак не влияет на частоту имплантации эмбрионов, либо же влияет негативно.
Поэтому специалисты выделили ряд возможных показаний к проведению процедуры вспомогательного хетчинга:
Каждая пациентка центра ЭКО, услышав о необходимости проведения процедуры вспомогательного хетчинга, ещё и за дополнительную стоимость, сразу же задаёт себе вопрос: что такое хетчинг? Необходим ли он на самом деле? Повлияет ли эта процедура на результат наступления беременности? Насколько он опасен для будущего ребёнка? Если же вспомогательный хетчинг в данном случае показан, его делать необходимо. Новейшие разработки и опыт специалистов делают эту процедуру абсолютно безопасной и продуктивной.
Лазерный хетчинг эмбрионов что это
Адрес: г.Москва, улица Советской армии, 7 (м. Достоевская)
Хетчинг переводится с английского, как вылупление (hatching). То есть хетчинг эмбрионов это «вылупление» эмбрионов из оболочки.
Экстракорпоральное оплодотворение – весомый вклад ученых, благодаря которому достигается успех в, казалось бы, абсолютно безнадежных случаях. Репродкутологи обладают множеством техник и методик, позволяющих справляться с бесплодием. Но по разным причинам при проведении ЭКО случаются и неудачные попытки. Одно из препятствий к долгожданной беременности путем искусственного оплодотворения – неспособность эмбриона закрепится в стенке матки. Вспомогательный хетчинг – эта та методика, которая помогает эмбриону вылупиться.
Хетчинг – что это?
При естественной беременности эмбрион (оплодотворенная яйцеклетка), передвигаясь по маточной трубе, достигает стадии бластоцисты. В матке, при нормальном развитии, зародыш должен покинуть блестящую оболочку. Это образование – белковая капсула, окружающая бластоцисту и выполняющая защитную функцию. Постоянное деление и рост клеток – бластомеров – эмбриона повышает давление внутри белковой капсулы. Это способствует ее истончению и разрыву. Выход из блестящей оболочки – самостоятельный хэтчинг – позволяет зародышу покинуть оболочку и прикрепиться к эндометрию (слизистой матки), так как сразу после выхода его клетки очень липкие. Впоследствии начинается процесс имплантации.
По аналогии процесс выхода из белковой оболочки сравнивают с «вылуплением» птенца из яичной скорлупы. Хэтчинг естественным путем завершается в полости матки спустя 5–6 суток после оплодотворения.
Вспомогательный хетчинг при ЭКО
В силу различных причин эмбрион не всегда может самостоятельно справиться и разорвать свою белковую капсулу. Вспомогательный хетчинг – искусственное (механическое (чаще всего лазерное) или химическое) воздействие на оболочку, направленное на истончение ее стенки (протокол), облегчая выход бластоцисты в полость матки.
Основная причина невозможности самостоятельного разрыва белковой капсулы – это изменение ее морфологических характеристик.
Белковая оболочка уплотняется и утолщается в таких случаях:
Виды вспомогательного хетчинга
Существует три основных вида вспомогательного хетчинга перед эмбриопереносом:
Химический хетчинг в связи с доказанными фактами эмбриотоксического действия практически не применяется. Используемая кислота для его проведения является агрессивной по отношению не только к капсуле, но и к бластомерам.
Механический хетчинг – это достойная, но постепенно устаревающая методика. Механическое воздействие на оболочку влечет вероятность повреждения эмбриона, которая составляет 1%. Вспомогательный хетчинг механическим путем проводится под мощнейшим увеличением микроскопа в эмбриологической лаборатории. Для его проведения используются микроинструменты. С помощью микропипетки фиксируют эмбрион. Тончайшей иглой выполняют один прокол, не задевая бластомеров. Второй прокол выполняют под углом к первому. Таким образом, нарушают плотность капсулы и эмбрион «выклевывается».
Существует еще одна методика лазерного вспомогательного хетчинга, когда в оболочке с помощью луча делают тоннель перпендикулярно поверхности эмбриона, но при этом до клеток не доходят.
Реже используют ферментный вспомогательный хетчинг, когда на оболочку воздействуют раствором энзимов. Это максимально приближенный метод к естественному хетчингу.
Вспомогательный хетчинг перед эмбриопереносом.
Показания:
Все показания к использованию вспомогательного хэтчинга относительны, ибо научно его польза не доказана, за исключением использования в протоколе искусственного оплодотворения замороженных эмбрионов. Каждый репродуктивный центр имеет собственную политику в отношении проведения микроманипуляции.
Основные показания:
К переносу готовят не более 2-х, в нашей клинике это чаще SET (перенос одного эмбриона наилучшего качества)
Учитывая, что микроманипуляция требует внимательного и точного подхода, хетчинг проводится поочередно. Для каждого эмбриона – отдельная процедура.
Методика относится к вспомогательным и уже рутинным микроманипуляционным методам, критерии результативности которой доказаны при переносе эмбрионов подвегрнутых криоконсервации.
Довольно часто данная методика в совокупности с другими факторами культивирования гамет, приносит долгожданный результат.