Линолевая кислота для чего
Линолевая кислота для чего
Линолевая кислота
Линолевая кислота относится к одному из двух классов незаменимых жирных кислот, которые необходимы организму человека и животных. Если человек не потребляет достаточное количество этих эссенциальных жирных кислот, то могут возникнуть некоторые проблемы со здоровьем. Экспериментальный рацион с недостаточным количеством линолеата (солевая форма кислоты) вызывает умеренное поражение кожи, выпадение волос и нарушения в процессе восстановлении кожи. Линолевая кислота выполняет особую роль в поддержании здоровья сердца. Рандомизированные клинические испытания показали, что замена насыщенного жира в пище линолевой кислотой снижает общее количество холестерина ЛПНП(липопротеины низкой плотности). Имеются также некоторые свидетельства того, что линолевая кислота улучшает чувствительность к инсулину и нормализует артериальное давление.
Поскольку линолевая кислота является основным питательным веществом, она обычно добавляется в энтеральные, парентеральные формы и детские смеси, где содержание жира может варьироваться в зависимости от конкретного использования. Существуют также средства с линолевой кислотой, предназначенные для местного писпользования: кремы, мази и др. При местном применении линолевая кислота помогает лечить расстройства кожи, связанные с ее дефицитом.
Линолевая кислота и ее изомер (конъюгированная линолевая кислота) активно используются в специальном спортивном питании для похудения за счет уменьшения подкожного жира. Также применяется в ряде БАДов, принимаемых для снижения риска заболеваний сердечно-сосудистой системы и даже для профилактики онкологических заболеваний. Также назначается в составе комплексной терапии при болезни Альцгеймера, показывая положительный эффект в патогенезе болезни на ранней стадии процесса.
Промышленный синтез линоленовой кислоты состоит в следующем. Вначале получают этиловый эфир линолевой кислоты путем смешивания 3-х компонентов: тетрабромстеариновой кислоты (перекристаллизованная), абсолютного этилового спирта и гранулированного цинка. Полученную смесь нагревают, учитывая, что реакция экзотермическая, периодически охлаждают. Минут через 5, когда начнется реакция отщепления брома, смесь помещают в обратный холодильник и она поддается кипячению 30 минут. Затем с определенным интервалом приливают раствор хлористого водорода. Полученную смесь совмещают с раствором поваренной соли, дожидаясь расслоения. Затем эмульсию центрифугируют и промывают.
Полученный эфир растворяют спиртовым 95% денатурированным раствором едкого натра и оставляют на ночь при комнатной температуре. Эту массу растворяют теплой водой с добавлением углекислого газа и разбавленной серной кислоты. Линолевая кислота всплывает на поверхность в виде прозрачного слоя. Полученную кислоту хранят под углекислым газом.
Действие на организм:
Линолевая кислота (18: 2ω6, цис, цис-9,12-октадекадиеновая кислота) является наиболее сильно потребляемой ПНЖК, обнаруженной в рационе человека. При потреблении линолевая кислота совершает 4 первичных пути. Как и все жирные кислоты, ее можно использовать как источник энергии. Ее можно этерифицировать с образованием нейтральных и полярных липидов, таких как фосфолипиды, триацилглицерины и сложные эфиры холестерина. В составе мембранных фосфолипидов линолевая кислота функционирует как структурный компонент для поддержания определенного уровня мембранной текучести трансдермального водного барьера эпидермиса. Кроме того, при высвобождении из мембранных фосфолипидов она может быть ферментативно окислена до различных производных, участвующих в клеточной передаче сигналов (то есть 13-гидрокси или 13-гидропероксиоктадекадиеновой кислоты( 13-H (P) ODE).
В качестве исходного соединения для семейства PU 6 PUFA линолевая кислота может быть удлиненной и ненасыщенной до других биоактивных СО 6 PUFA, таких как γ-линоленовая кислота (18: 3ω6) и арахидоновая кислота (20: 4ω6). Впоследствии арахидоновая кислота может быть превращена в мириады биологически активных соединений, называемых эйкозаноидами, такими как простагландины и лейкотриены. Эти эйкозаноиды важны при нормальной метаболической функции клеток и тканей, но при постоянном выделении и избытке они, как известно, способствуют ряду хронических заболеваний, таких как воспаление и онкология.
После потребления и абсорбции энтероцитами, выстилающими тонкий кищечник, линолевую кислоту упаковывают в хиломикроны в виде фосфолипидов, триацилглицеринов или эфиров холестерина и затем поступает в общую циркуляцию (подключичную вену) через грудной канал. Линолевая кислота доставляется в печеночные и внепеченочные ткани, так как хиломикроны делипидируются в пути и очищаются печенью при ее переходе на гораздо более мелкие остаточные частицы. После клеточного поглощения судьба линолевой кислоты определяется потребностями ткани, то есть включением в мембранные фосфолипиды, десатурацией и удлинением и т. Д.
Линолевая кислота является существенным (незаменимым) питательным веществом, которое содержит две двойные связи на девятом и 12-м атомах углерода из карбонильной функциональной группы. Поскольку люди не могут включать двойную связь за девятый углерод жирной кислоты, эта жирная кислота не может быть синтезирована и, следовательно, должна потребляться с пищей. В качестве основного компонента церамидов линолевая кислота участвует в поддержании трансдермального водного барьера эпидермиса. Содержание линолевой кислоты у младенцев может быть столь низким, как 0,5-2,0 % энергии, и лишение линолевой кислоты (то есть безжирное внутривенное вскармливание) может привести к чешуйчатым повреждениям кожи, замедлению роста и изменениям плазменной жирной кислоты и тромбоцитопении. Поскольку линолевая кислота находится в изобилии в детских смесях и продуктах питания и в грудном молоке человека, существенная нехватка жирных кислот не присуща здоровым людям. Аналогичным образом доказательство недостатка PU6 PUFA крайне редко встречается у взрослого населения в отсутствие врожденной ошибки метаболизма, то есть дефицита FADS2 (десатуразы жирных кислот 2, Δ6 десатуразы), скорости, ограничивающей скорость десатурации линолевых кислота к арахидоновой кислоте.
Хотя линолевая кислота является важным питательным веществом, «нет никакой конкретной информации о количестве линолевой кислоты, необходимой для коррекции симптомов (ω6) дефицита ПНЖК», поэтому рекомендуемые ежедневные дозы(RDA) еще не установлены. Как таковые диетические эталонные дозы линолевой кислоты составляют адекватные дозы для женщин и мужчин в возрасте от 19 до 50 лет 12 г / сут и 17 г / сут соответственно. Данные основаны на приблизительном медианном потреблении здоровых людей.
Основными диетическими источниками линолевой кислоты являются растительные масла, орехи, семена, мясо и яйца. Потребление линолевой кислоты в рационе начало увеличиваться примерно в 1969 году и параллельно с введением соевого масла в качестве основной коммерческой добавки для многих обработанных пищевых продуктов. Производные продукты, содержащие соевое масло в качестве основного ингредиента, богаты линолевой кислотой. Хотя линолевая кислота составляет
Может быть токсичным при вдыхании, при контакте с кожей и при проглатывании.
При оральном применении (LD50): 3200 мг / кг [мышь].
При оральном применении (LD50): 3200 мг / кг [крыса].
Конъюгированная линолевая кислота и её влияние на увеличение скорости снижения веса и улучшение антропометрических показателей у молодых мужчин с избыточной массой тела на протяжении комплексной программы по снижению веса
Полный текст:
Аннотация
Исходная информация: С увеличением распространенности ожирения в Ираке возрастает приверженность к физической активности среди молодых людей. В то же время увеличение количества предлагаемых пищевых добавок способствует улучшению физической формы и позволяет избавиться от лишнего веса. Конъюгированная линолевая кислота (СLA – сonjugated linoleic acid) часто используется для такой цели.
Цель: Текущее исследование было предназначено в целях апробирования действия конъюгированной линолевой кислоты и ее способности действительно ускорять снижение веса в сочетании с диетой и умеренными физическими упражнениями, а также исследование их сочетанного эффекта в отношении атропометрических показателей при ожирении.
Объекты и методы: 60 молодых мужчин добровольцев были включены в исследование, которое предполагало использование диеты с пониженным содержанием углеводов и жиров, а также комплекс высокоинтенсивных умеренных физических упражнений с временным интервалом (HIIT – high intensity interval exercise). 40 из них получали конъюгированную линолевую кислоту (1000 мг/день) в течение 8 недель, в то время как оставшиеся 20 участников составили контрольную группу. Индекс массы тела (body mass index – BMI), отношение окружности талии к окружности бедер (waist/hip ratio – WHR), сагиттальный абдоминальный диаметр (sagittal abdominal diameter – SAD), процент содержания жира в организме (body adiposity index – BAI) были зарегистрированы в начале, после 4 и 8 недель исследования.
Результаты: Группа участников, которая употребляла конъюгированную линолевую кислоту, показала существенно большее снижение всех показателей в конце исследования. В контрольной группе снижение показателей было значительным, но такие показатели как BMI и SAD оказались менее сниженными, чем в основной группе, однако WHR и BAI оставались аналогичными. Процент изменений отличался между 1-ой и 2-ой частями исследования, также показаны статистические различия между двумя группами и для различных показателей. Наиболее важным явилось то, что SAD снизился значительно быстрее за время первых 4-х недель исследования, указывая на преимущественное уменьшение висцерального жира. Напротив, WHR снизился за время 2-ой половины изучения, больше за счет снижения абдоминального жирового депо.
Обсуждение: Независимо от механизма действиям СLA, ускорение действия в снижении веса происходит только в комбинации с диетой и физической активностью. Это также соответствует преимущественно естественному снижению более метаболически активного висцерального жира до перехода к снижению подкожного жира. Является ли данная пищевая добавка эффективной или нет, требует дальнейшего изучения.
Ключевые слова
Для цитирования:
Аккила С.С. Конъюгированная линолевая кислота и её влияние на увеличение скорости снижения веса и улучшение антропометрических показателей у молодых мужчин с избыточной массой тела на протяжении комплексной программы по снижению веса. Ожирение и метаболизм. 2018;15(1):19-24. https://doi.org/10.14341/omet2018119-24
For citation:
Akkila S.S. Conjugated linoleic acid accelerates weight loss and improves anthropometric measures in overweight young adult males during weight loss program. Obesity and metabolism. 2018;15(1):19-24. https://doi.org/10.14341/omet2018119-24
Введение
В 2014г. в Ираке доля лиц с ожирением (ИМТ ≥30) составила 21.2%, с избыточной массой тела (ИМТ ≥25) – более 50 % [1]. Однако, за последние несколько лет наблюдается увеличение интереса к физической активности среди подростков и молодых мужчин Ирака, что влечет за собой с такой целью резкое увеличение количества спортивных залов и клубов. Многие из данных заведений обеспечены множеством пищевых добавок, которые, предположительно, повышают метаболизм, ускоряют снижение веса и улучшают наращивание мышечной массы. Одной из общеупотребимых пищевых добавок является конъюгированная линолевая кислота. Она включает группу позиционных и геометрических (цис- и транс-) изомеров жирной кислоты, соединенных между собой двойной связью [2]. Несколько механизмов действия конъюгированной линолевой кислоты были предложены в различных исследованиях, включая супрессию энергии всасывания, липогенеза и адипогенеза, усиление энергии расхода и апоптоз преадипоцитов [3]. Таким образом, многие исследования показали благоприятные структурные эффекты конъюгированной линолевой кислоты в отношении различных видов животных, другие исследования показали только незначительное положительное влияние на организм человека. Различные дозированные системы, типы изомеров и животные модели в сравнении с несколькими данными исследований на человеке могут объяснить наблюдаемые отличия в изучении действия конъюгированной линолевой кислоты [5].
Текущее исследование было запланировано для определения влияния конъюгированной линолевой кислоты как пищевой добавки на антропометрические показатели у молодых мужчин Ирака с избыточной массой тела, участвующих в комплексной программе по снижению массы тела, включая диету и физические упражнения умеренной интенсивности.
Объекты и методы
Условия
Исследование выполнялось в двух спортивных залах Аль-Карского района (Багдад, Ирак) на протяжении 8 недель (сентябрь 2016г., октябрь 2016 г.).
Этические вопросы
Все участники были подробно проинформированы о подготовке исследования и его цели, а также все подписали информированное согласие. Измерения тела регистрировались с соблюдением конфиденциальности. Вопросы конфиденциальности ни разу не были скомпрометированы.
Определение случаев, включенных в исследование, критерии включения и исключения. Исследование включало 60 мужчин молодого возраста с избыточной массой тела (ИМТ=25–29,9), которые занимались в вышеупомянутых спортивных залах с целью снижения веса. Никто из исследуемых не принимал препаратов, влияющих на метаболизм; не имел эндокринных и хронических заболеваний, ограничивающих физическую активность или нарушающих обмен веществ в организме. Все участники были согласны с программой исследования, включая диету и физические упражнения.
Выборка и рандомизация
60 молодых мужчин (24,7±1,78 лет) 23–26 лет были включены в исследование. Участников выбирали в произвольном порядке каждый 2-ой день в течение 2 недель, после их согласия и готовности участвовать.
Исходный и окончательный результаты. Первоначальный результат состоял в том, чтобы определить, влияет ли сочетанное применение конъюгированной линолевой кислоты совместно с диетой и физическими упражнениями умеренной интенсивности на снижение веса в сравнении с использованием только диеты и умеренной физической нагрузки. Окончательный результат был основан на определении изменений в висцеральном и подкожном жировых депо за определенный период времени с использованием антропометрических показателей у лиц с ожирением.
Расчет калорий
Индивидуальный базальный метаболический коэффициент был рассчитан с помощью уравнения Mifflin-St.Jeor (Mifflin-St.Jeor equation) [6]:
С того момента, когда обследуемые стали заниматься физическими упражнениями (умеренные высокоинтенсивные кардио упражнения 3–5 дней в неделю), увеличилась ежедневная потребность в калориях в 1,55 раз. (Ежедневное потребление калорий = BMR x 1,55) [7]. Потребность участников в калориях составила 2838,1±98,06 SD (Ккал/день). Потребность была скорректирована после 4-х недель с учетом изменений массы тела.
Диета
Физические упражнения
Участники исследования были обучены высокоинтенсивным интервальным тренировкам (HIIT) 3–5 дней/неделю с использованием беговой дорожки. Занятия состояли из 5 циклов, продолжительностью 25 минут. Каждый цикл (5 минут) включал 3 минуты быстрой ходьбы (5–6 км/час) с последующей 2-минутной пробежкой (9,5 км/час). Выполняемым занятиям предшествовала 3-минутная разминка, 3-минутный период охлаждения с целью предупреждения мышечных спазмов.
Исследуемые группы и антропометрические измерения: испытуемые участники были поделены на 2 группы. 1-я группа (40 человек) ежедневно однократно принимала 1000 мг конъюгированной линолевой кислоты (Nutrex Research Inc., USA) в течение 8 недель. В исследовании использовались 10-цис- и 12-транс- изомеры. 2-я группа (20 человек) соблюдала только диетические рекомендации и выполняла физические упражнения на протяжении 8 недель.
Все антропометрические показатели и расчеты записывались непосредственно перед исследованием (первоначальные данные), в конце 4-ой недели и в конце 8-ой недели. Измерения проводились через 4 часа после приема пищи и были выполнены в соответствии с протоколом Всемирной организации здравоохранения [9]. Расчеты проводились согласно установленным эпидемиологическим стандартам [10].
Измерение веса проводилось без обуви и одежды, только в шортах, при помощи электронных весов (ANYSCALES® TCS-200-RT, Australia) с точностью до 100 г. Весы оснащены ростомером, который используется для измерения роста стоя (в анатомическом положении) с точностью до см. Окружности талии и бедер снимаются в положении стоя только в шортах. Окружность талии измеряется в средней точке между нижним краем последнего ребра и верхней частью подвздошного гребня с помощью сантиметровой ленты. Окружность бедер измеряется в самой широкой части ягодиц сантиметровой лентой параллельно горизонтальной поверхности [11]. Каждый показатель повторялся дважды; если данные измерений оказывались с разницей в пределах 1 см, выводилось среднее значение. Если различие между 2-мя показателями превышало 1 см, регистрировались оба значения. Сагиттальный абдоминальный диаметр (SAD) измерялся в наклонном положении с согнутыми коленями при помощи сагиттометра [9], раздвижной перекладины калипера с линейкой (SkynDex®, USA, d: 0.1 cm). Размер снимался на уровне талии, нижняя ручка калипера устанавливалась снизу, верхняя на уровне живота сверху, размеры регистрировались в конце выдоха с осью калипера в вертикальном положении. Величина SAD в норме <25 cм [12].
Индекс массы тела рассчитывался путем деления веса, кг на рост, м в квадрате кг/м2). Величина в пределах 18,5–24,9 относится к норме, 25–29,9 – к избыточной массе тела [13]. Отношение окружности талии к окружности бедер вычисляется путем деления окружности талии на окружность бедер в см. Величина более чем 0,9 считается высокой[14].
Коэффициент содержания жира (BAI) в организме рассчитывается с помощью формулы:
Предпочтительно достичь величины 8%–21% [16].
Статистический анализ: Для анализа полученных данных используется программа SPSS software version 18.0. Переменные и множества как правило распределяются и представляются как количество процентов для категорий переменных, среднее ± стандартное отклонение (SD) для числовых переменных. Независимый обучающий т-тест использовался для сравнения возможностей групп.
Результаты
Ни у кого из обследуемых, получавших конъюгированную линолевую кислоту, не отмечалось побочных эффектов за период исследования. В таблице 1 показана частота распределения показателей с отклонением от нормы у молодых мужчин с избыточной массой тела как в группе принимающих конъюгированную линолевую кислоту, так и в контрольной группе в начале и в конце исследования. В конце исследования выявлено резкое снижение BMI и SAD в обоих группах, но снижение оказалось больше в группе принимающих конъюгированную линолевую кислоту. WHR и BAI существенно снизились в CLA группе, что не наблюдалось в контрольной группе.
Таблица 1. Начальная и конечная частота распределения отклонений антропометрических показателей у лиц с ожирением в основной и контрольной группах
Избыточный вес BMI
BMI: Индекс Массы Тела, WHR: отношение окружности талии к обхвату бедер, SAD: Сагиттальный Абдоминальный Диаметр, BAI: процент содержания жира в организме, **: Высокая статистическая значимость с р-величиной <0,01.
В таблице 2 показаны изменения антропометрических показателей в динамике у лиц с ожирением в основной и контрольной группах. BMI и SAD стабильно снижались в обоих группах, но общее число изменений оказалось значительно больше в основной группе (рис. 1). В основной группе в начале исследования было отмечено повышение показателя WHR, схожие изменения наблюдались и в контрольной группе, но в конце исследования, что свидетельствует о более быстром темпе снижения. Показатель BAI варьировал значительно больше в основной группе как на 4-ой, так и на 8-ой неделях исследования.
Таблица 2. Динамика изменений антропометрических показателей у лиц с ожирением в основной и контрольной группах. (Представлены средние числовые значения ± SD)
BMI: Индекс Массы Тела, WHR: отношение окружности талии к обхвату бедер, SAD: Сагиттальный Абдоминальный Диаметр, BAI: процент содержания жира в организме, *: статистическая значимость с р-величиной <0.05, **: Высокая статистическая значимость с р-величиной <0.01.
Рис. 1. Процент изменений антропометрических показателей у лиц с ожирением в основной и контрольной группах после 4 и 8 недель исследования.
Представленные данные = средняя величина, погрешности = SD. BMI: Индекс Массы Тела, WHR: отношение окружности талии к окружности бедер, SAD: Сагиттальный Абдоминальный Диаметр, BAI: процент содержания жира в организме. *: статистическая значимость с р-величиной <0,05.
На рисунке 1 показан процент изменений атропометрических показателей у лиц с ожирением в динамике на 4-ой и 8-ой неделе исследования. Для всех параметров и в любые сроки исследования процент изменений в основной группе был значимо больше, чем в контрольной группе, за исключением показателя SAD после 2-ой половины 4-ой недели, который изменялся в обеих группах с аналогичной скоростью.
Суммарная доля по показателям BMI и BAI в обеих группах существенно не отличалась между 1-ой и 2-ой частью исследования. Значение WHR значительно больше снизилось во 2-ой половине исследования. Уменьшение показателя SAD оказалось больше в группе обследуемых, принимавших конъюгированную линолевую кислоту во время первых 4-х недель исследования. Напротив, этот же показатель в контрольной группе значительно снизился за время вторых 4-х недель исследования.
Обсуждение
Текущее исследование было запланировано согласно правилам снижения веса, что приводило к ограничению энергетических субстратов, путем сокращения их потребления и увеличения расхода энергии [17]. Уменьшение антропометрических показателей у лиц с ожирением оказалось более значимым в группе молодых мужчин, дополнительно принимавших конъюгированную линолевую кислоту, что свидетельствует о благоприятном действии лекарственных препаратов на снижение веса. Согласно другим исследованиям, выполненным на человеке, конъюгированная линолевая кислота использовалась в качестве отдельной пищевой добавки [18], либо в составе пищевых продуктов (например, молочные продукты) [19], эффективно влияющих на снижение веса, при условии ограничения калорийности рациона. Согласно различным исследованиям, вопрос о точном механизме действия конъюгированной линолевой кислоты до сих пор остается спорным. Некоторые исследования предполагают, что конъюгированная линолевая кислота уменьшает потребление пищи и сокращает жировые отложения с увеличением или без расхода энергии [3]. Другие ученые утверждают, что данное вещество снижает созревание преадипоцитов и увеличивает апоптоз зрелых адипоцитов [20]. Это новое объяснение наиболее подходит для текущего исследования, так как предварительно рассчитаны ограничения калорийности рациона и контроль режима питания.
Изменения антропометрических показателей у лиц с ожирением в основной группе данного исследования были значительно больше, чем в контрольной группе, за исключением индекса массы тела, который был одинаковым в обоих группах.
Недостатком индекса массы тела является неспособность разграничить тощую массу тела и жировые депо [21, 22] и пр.
В настоящем исследовании показатели SAD, WHR и BAI существенно не уменьшились в контрольной группе, кроме BMI. Кроме того, снижение BMI за время второй половины исследования происходило медленнее в обеих группах, возможно, по причине наращивания мышечной массы вторично, на фоне физических упражнений умеренной интенсивности. Становится очевидным, что распределение жира является более важным детерминирующим фактором, связанным с метаболическими нарушениями при ожирении, чем степень избыточного веса, измеряемая по BMI. SAD, являющийся показателем висцеральной абдоминальной ткани (VAT), основан на том, что подкожная ткань варьирует в измерениях калипера в зависимости от воздействия силы тяжести [23]. С другой стороны, значение WHR рассчитывается с помощью измерения окружности талии, которая в свою очередь зависит от VAT и SAT [24]. Предыдущие исследования по снижению веса доказали, что наблюдается преимущественное снижение от VAT к SAT в сочетании с умеренным ограничением в питании [25].
В настоящем исследовании снижение SAD предшествовало снижению WHR. Уменьшение VAT, о чем свидетельствует снижение SAD, произошло намного быстрее и при более высоких показателях в основной группе во время первых 4-х недель исследования, но в контрольной группе данный показатель увеличивался постепенно, достигнув максимума во время вторых 2-х недель исследования. Это свидетельствует об ускоренном эффекте CLA в снижении VAT. Такой процесс может быть связан с тем, что VAT более метаболически активен, чем SAT, возможно, благодаря большей клеточности, васкуляризации, более лучшей иннервации и чувствительности к некоторым гормонам, подобно глюкокортикоидам (выброс которых стимулируется диетой и физической нагрузкой) [26]. SAD продолжал значительно уменьшаться в контрольной группе во время вторых 4-х недель исследования возможно потому, что уменьшение жира преимущественно все же связано с VAT. Данный факт подтверждается снижением WHR, который в обоих группах был незначительным первые 4 недели исследования, но увеличился за вторые 4 недели, в наибольшей степени в основной группе обследуемых лиц.
Действие CLA на WHR и SAT заключается в их снижении, что может быть связано с влиянием физических упражнений. Физические тренировки могут существенно уменьшить VAT у лиц с избыточной массой тела даже без ограничений в питании [27], но это требует более длительной работы, воздействующей на абдоминальный SAT, так как SAT адаптационно реагирует в ответ на тренировочные упражнения [28].
CLA может изменить такой адаптационный ответ после ичерпанности преимущественного снижения VAT. Возможные механизмы включают увеличение физической активности и постфизическое окисление жиров и увеличение катехоламиндуцированного липолиза [29].
Выводы
В то время, как ограничения в питании и увеличение физической активности дают удовлетворительные результаты по снижению массы тела и коррекции антропометрических показателей у мужчин с избыточной массой тела, CLA в качестве пищевой добавки может ускорить данные результаты. Существует ли подобный эффект при высоких степенях ожирения и сохраняется ли он с течением времени – требует дальнейшего изучения.
Конфликт интересов
Автор объявляет об отсутствии конфликтов интересов или специального финансирования для текущего изучения. Автор также благодарен за ощутимую помощъ и сотрудничество Mr. Rami M. Khalid.