Лабораторные методы исследования что это такое
Диагностика инфекционных заболеваний
Диагностика инфекционных заболеваний является одной из самых сложных проблем в клинической медицине. Лабораторные методы исследования при ряде нозологических форм играют ведущую, а в целом ряде клинических ситуаций решающую роль не только в диагностике, но и в определении конечного исхода заболевания.
У одних пациентов для диагностики этиологии инфекционно-воспалительного процесса достаточно провести бактериологическое исследование, в других клинических ситуациях решающее значение имеют данные серологических исследований, в третьих, предоставить полезную информацию может только метод ПЦР. Однако наиболее часто в клинической практике врачу-клиницисту необходимо использовать данные различных методов лабораторных исследований.
Бактериологические методы исследования
Бактериологические исследования наиболее часто проводят при подозрении на гнойно-воспалительные заболевания (составляют 40-60% в структуре хирургических заболеваний) с целью их диагностики, изучения этиологической структуры, определения чувствительности возбудителей к антибактериальным препаратам. Результаты бактериологических анализов способствуют выбору наиболее эффективного препарата для антибактериальной терапии, своевременному проведению мероприятий для профилактики внутрибольничных инфекций.
Возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний являются истинно-патогенные бактерии, но наиболее часто условно-патогенные микроорганизмы, входящие в состав естественной микрофлоры человека или попадающие в организм извне. Истинно-патогенные бактерии в большинстве случаев способствуют развитию инфекционного заболевания у любого здорового человека. Условно-патогенные микроорганизмы вызывают заболевания преимущественно у людей с нарушенным иммунитетом.
Бактериологические исследования при заболеваниях, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами, направлены на выделение всех микроорганизмов, находящихся в патологическом материале, что существенно отличает их от аналогичных исследований при заболеваниях, вызванных истинно патогенными микроорганизмами, когда проводится поиск определенного возбудителя.
Для получения адекватных результатов бактериологического исследования при гнойно-воспалительных заболеваниях особенно важно соблюдать ряд требований при взятии биоматериала для анализа, его транспортировки в лабораторию, проведения исследования и оценки его результатов.
Доставленный в бактериологическую лабораторию биоматериал первоначально подвергается микроскопическому исследованию.
Микроскопическое исследование мазка (бактериоскопия), окрашенного по Граму или другими красителями, проводят при исследовании мокроты, гноя, отделяемого из ран, слизистых оболочек (мазок из цервикального канала, зева, носа, глаза). Результаты микроскопии позволяют ориентировочно судить о характере микрофлоры, ее количественном содержании и соотношении различных видов микроорганизмов в биологическом материале, а также дают предварительную информации об обнаружении этиологически значимого инфекционного агента в данном биоматериале, что позволяет врачу сразу начать лечение (эмпирическое). Иногда микроскопия позволяет выявить микроорганизмы, плохо растущие на питательных средах. На основании данных микроскопии проводят выбор питательных сред для выращивания микробов, обнаруженных в мазке.
Культивирование микроорганизмов. Посев исследуемого биоматериала на питательные среды производят с целью выделения чистых культур микроорганизмов, установления их вида и определения чувствительности к антибактериальным препаратам. Для этих целей используют различные питательные среды, позволяющие выделить наибольшее количество видов микроорганизмов. Оптимальными являются питательные среды, содержащие кровь животного или человека, а также сахарный бульон, среды для анаэробов. Одновременно производят посев на дифференциально-диагностические и селективные (предназначенные для определенного вида микроорганизмов) среды. Посев осуществляют на стерильные чашки Петри, в которые предварительно заливают питательную среду для роста микроорганизмов.
Микроскопия мазков, окрашенных по Граму
Чашки Петри с посевами инкубируют в термостате при определенных температурных, а для ряда микроорганизмов газовых (например, для выращивания анаэробов создают условия с низким содержанием кислорода) режимах в течение 18-24 часов. Затем чашки Петри просматривают. Количественную обсемененность доставленного биоматериала микрофлорой определяют по числу колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл или 1 мг исследуемого образца. При просмотре чашек Петри выявляют некоторые особенности изменения цвета среды, ее просветления в процессе роста культуры. Многие группы бактерий образуют характерные формы колоний, выделяют пигменты, которые окрашивают колонии или среду вокруг них. Из каждой колонии делают мазки, окрашивают по Граму и микроскопируют. Оценивают однородность бактерий, форму и размер, наличие спор или других включений, капсулы, расположение бактерий, отношение к окраске по Граму. Вся эта информация служит важнейшей составляющей для выбора сред и получения в дальнейшем чистой культуры каждого микроорганизма.
Колонии отсевают на плотные, жидкие, полужидкие питательные среды, оптимальные для культивирования определенного вида бактерий.
Выделенные чистые культуры микроорганизмов подвергают дальнейшему изучению в диагностических тестах, основанных на морфологических, ферментативных, биологических свойствах и антигенных особенностях, характеризующих бактерий соответствующего вида или варианта.
Определение чувствительности к антибактериальным препаратам. Чувствительность к антимикробным препаратам изучают у выделенных чистых культур микроорганизмов, имеющих этиологическое значение для данного заболевания. Поэтому в направлении на бактериологические анализы требуется указать диагноз заболевания у больного. Определение чувствительности бактерий к спектру антибиотиков помогает лечащему врачу правильно выбрать препарат для лечения больного.
Установить этиологическую роль условно-патогенной микрофлоры помогают также нарастание количества и повторность выделения бактерий одного вида от больного в процессе заболевания.
Врач-клиницист должен знать, что положительный результат бактериологического исследования в отношении биологического материала, полученного из в норме стерильного очага (кровь, плевральная жидкость, спинномозговая жидкость, пунктат органа или ткани), всегда тревожный результат, требующий немедленных действий по оказанию медицинской помощи.
Серологические методы исследования
В основе всех серологических реакций лежит взаимодействие антигена и антитела. Серологические реакции используются в двух направлениях.
1. Обнаружение с диагностической целью антител в сыворотке крови обследуемого. В этом случае из двух компонентов реакции (антитело, антиген) неизвестным является сыворотка крови, так как постановка реакции проводится с заведомо известными антигенами. Положительный результат реакции свидетельствует о наличии в крови антител, гомологичных применяемому антигену; отрицательный результат указывает на отсутствие таковых. Достоверные результаты получают при исследовании «парных» сывороток крови больного, взятой в начале заболевания (3-7-й день) и через 10-12 дней. В этом случае удается наблюдать динамику нарастания антител. При вирусных инфекциях лишь четырехкратное и большее повышение титра антител во второй сыворотке имеет диагностическое значение.
С внедрением в практику лабораторий метода иммуноферментного анализа (ИФА) стало возможным определять в крови больных антитела, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов (IgM и IgG), что существенным образом повысило информативность серологических методов диагностики. При первичном иммунном ответе, когда иммунная система человека взаимодействует с инфекционным агентом в первый раз, синтезируются преимущественно антитела, относящиеся к иммуноглобулинам класса М. Лишь позднее, на 8-12 день после попадания антигена в организм, в крови начинают накапливаться антитела иммуноглобулинов класса G. При иммунном ответе на инфекционные агенты вырабатываются также и антитела класса А (IgA), которые играют важную роль в защите от инфекционных агентов кожи и слизистых оболочек.
2. Установление родовой и видовой принадлежности микроба или вируса. В этом случае неизвестным компонентом реакции является антиген. Такое исследование требует постановки реакции с заведомо известными иммунными сыворотками.
Серологические исследования не обладают 100%-й чувствительностью и специфичностью в отношении диагностики инфекционных заболеваний, могут давать перекрестные реакции с антителами, направленными к антигенам других возбудителей. В связи с этим оценивать результаты серологических исследований необходимо с большой осторожностью и учетом клинической картины заболевания. Именно этим обусловлено использование для диагностики одной инфекции множества тестов, а также применение метода Western-blot для подтверждения результатов скрининговых методов.
В последние годы прогресс в области серологических исследований связан с разработкой тест-систем для определения авидности специфических антител к возбудителям различных инфекционных заболеваний.
Затем развитие иммунного процесса постепенно (это могут быть недели или месяцы) идет в сторону синтеза лимфоцитами высокоспецифичных (высокоавидных) IgG-антител, более прочно связывающихся с соответствующими антигенами. На основании этих закономерностей иммунного ответа организма в настоящее время разработаны тест-системы для определения авидности специфических IgG-антител при различных инфекционных заболеваниях.
Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование и тем самым с помощью серологических методов установить период инфицирования пациента. В клинической практике наиболее широкое распространение нашло определение авидности антител класса IgG при токсоплазмозе и цитомегаловирусной инфекции, что дает дополнительную информацию, полезную в диагностическом и прогностическом плане при подозрении на эти инфекции, в особенности при беременности или планировании беременности.
Метод полимеразной цепной реакции
Полимеразная цепная реакция (ПЦР), являющаяся одним из методов ДНК-диагностики, позволяет увеличить число копий детектируемого участка генома (ДНК) бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Тестируемый специфический для данного генома отрезок нуклеиновой кислоты многократно умножается (амплифицируется), что позволяет его идентифицировать.
Сначала молекула ДНК бактерий или вирусов нагреванием разделяется на 2 цепи, затем в присутствии синтезированных ДНК-праймеров (последовательность нуклеотидов специфична для определяемого генома) происходит связывание их с комплементарными участками ДНК, синтезируется вторая цепь нуклеиновой кислоты вслед за каждым праймером в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы. Получается две молекулы ДНК. Процесс многократно повторяется. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК, то есть одной бактерии или вирусной частицы.
Виды и методы лабораторных исследований в медицине
Совокупность видов и методов лабораторных исследований является важной составляющей диагностирования болезней и определения серьезных патологий. Самый распространенный тип лабораторного исследования – анализ. Выбор вида или метода анализа находится в зависимости от конечной цели исследования.
Виды лабораторных исследований в медицине
Анализы классифицируются по типам забираемых для их проведения материалов. Исходя из этого, соответственно выделяется:
Методы медицинских лабораторных исследований
1. Лабораторно-инструментальный метод
Этот метод представляет собой совокупность способов проведения исследований, конечной целью которых является диагностирование различных болезней. В составе метода выделяется:
2. Клинико-лабораторный метод
Представляет собой совокупность экспериментальных мероприятий, тестирований, проводящихся при непосредственном участии пациентов. Клинико-лабораторное исследование дают возможность проанализировать эффективность препаратов или методик лечения. Преимущественно применяется для обнаружения побочных эффектов препаратов и медикаментов, еще не вышедших в массовое обращение.
3. Лабораторное исследование крови
Этот метод позволяет с точностью определить даже малейшие отклонения в работе всех органов и систем пациента. В составе метода выделяется:
4. Лабораторные исследования почек
Среди лабораторных методов исследования почек выделяются следующие:
5. Лабораторные исследования мочи
Лабораторные методы исследования мочи позволяет провести диагностику и оценку функциональности почек, мочевого пузыря, а также определить наличие и степень, стадии воспалительных процессов.
Если будут обнаружены отклонения вне зависимости от их природы, потребуются дополнительные, узкие, но более точные методы лабораторных исследований. Например:
Лабораторные методы исследования
Содержание
Лабораторные методы исследования применяются для выявления различных патологий, заболеваний и иных проблем со здоровьем. Одним из основных методов лабораторных исследований является анализ. Какой именно анализ проводится – напрямую зависит от целей и задач диагностики.
Основные лабораторные методы исследования
На данный момент выполняются следующие виды лабораторных методов исследования:
Лабораторно-инструментальные исследования
Лабораторно-инструментальными исследованиями принято называть совокупность методов и инструментов, применяемых для проведения анализов, необходимых для диагностики заболеваний. Выбор конкретного инструмента и метода, используемых для анализа, осуществляется в соответствии с целью исследования.
В зависимости от этого выделяют:
Клинические лабораторные исследования
Под понятием клинических лабораторных исследований понимают тестирования и эксперименты, которые проводятся при участии людей. Они осуществляются для оценки эффективности новых фармацевтических препаратов, способов лечения. Их ключевая цель – выявить возможные побочные эффекты.
Фактически такой метод лабораторного исследования является ключевым этапом подготовки перед впуском медицинского препарата в продажу.
Лабораторные методы исследования крови
В настоящее время проводится несколько типов анализа крови, то есть:
Лабораторные методы исследования мочи
Общий анализ мочи относят к категории основных методов лабораторных исследований, что во многом обусловлено его простотой. Цель исследования – определить, как работают почки и мочевой пузырь, подтвердить или опровергнуть наличие воспалительных процессов. Своевременное проведение такого анализа требуется для предупреждения развития пиелонефрита и цистита.
Если в ходе общего анализа были обнаружены отклонения, проводится повторное исследование с использованием более точных методов, то есть:
Лабораторные методы исследования почек
Основные лабораторные методы исследования почек:
Подготовка пациента к лабораторным исследованиям
Важно понимать, что правильная подготовка пациента к лабораторным исследованиям – залог достоверности полученных результатов. А в частности, анализ крови в обязательном порядке проводится натощак (то есть не раньше, чем через восемь часов после крайнего приема твердой пиши или любых напитков за исключением воды). Также перед сдачей крови не рекомендуется курить. Для анализа мочи требуется около 150 мл биологического материала, забор нужно проводить утром после принятия душа. На анализ кала сдаются утренние испражнения, которые помещаются в стерильную тару (например, емкость можно обработать кипятком).
Лабораторные методы исследования
Лабораторные методы исследования являются важным методом определения различных заболеваний и патологий. Одним из типов лабораторной диагностики является анализ, выбор которого зависит от цели диагностики.
Основные виды лабораторных методов исследования
Разнообразие анализов зависит от типа забора тканей для исследования. На сегодняшний день выделяются такие виды:
Лабораторно-инструментальные исследования
Лабораторно-инструментальные исследования – это совокупность методов и инструментов проведения анализов, предназначенных для диагностики различных заболеваний. Выбор метода и инструмента проведения анализа зависит от цели исследования.
Исходя из этого выделяют:
Клинические лабораторные исследования
Клинические лабораторные исследования – эксперименты, тестирования, которые проводятся с участием людей.
Клинические лабораторные исследования предназначены для анализа эффективности новых медицинских препаратов или методов лечения. Подобные исследования предназначены для определения побочных эффектов.
Клинические лабораторные исследования являются важнейшим этапом перед выпуском препарата на рынок. Такие исследования невозможно проводить без участия людей, так как показатели диагностики результатов на животных нельзя экстраполировать на человека.
Лабораторные методы исследования крови
Лабораторные методы исследования крови – важный этап диагностики заболеваний, так как позволяет определить малейшие изменения работы систем и органов человека.
Выделяются несколько видов анализа крови:
Лабораторные методы исследования мочи
Общий анализ мочи наиболее популярный способ исследования мочи, что связано с его относительной простотой. Такое исследование проводят для оценки работы почек и мочевого пузыря и определения воспалительных процессов. Это необходимо для предупреждения развития цистита или пиелонефрита.
При обнаружении каких-либо отклонений, могут использоваться другие, более точные методы исследования мочи.
К этим методам диагностики относятся следующие виды анализов:
Лабораторные методы исследования почек
К методам, исследования почек, относят рентгеноскопию, ультразвуковое и радиоизотопное исследование, пункционную биопсию.
Подготовка пациента к лабораторным исследованиям
Подготовка пациента является важнейшим этапом проведения лабораторных исследований, так как от нее зависит адекватность полученных результатов.
Анализ крови проводится натощак, не ранее чем через 8 часов после последнего приема твердой пищи или напитков, кроме воды. Перед забором крови рекомендуется отказаться от курения.
Для анализа мочи необходимо около 150 мл утренней мочи, перед забором которой необходимо принять душ.
Для анализа кала необходимы утренние испражнения. Главное, чтобы тара для забора кала была стерильна, для этого можно обработать емкость кипятком.
Центр внешнего контроля качества клинических лабораторных исследований
Организация «Центр внешнего контроля качества клинических лабораторных исследований» действует на основании Федерального Закона «Организация и проведение производственного контроля за соблюдением санитарных правил и выполнением санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий». Главной задачей центра является контроль проведения лабораторных следований и соблюдения правил гигиены.
Современные лабораторные и инструментальные методы исследования на выставке
Методы и инструменты лабораторных исследований практически не изменяются уже долгое время. Но обнаружение новых болезней и более глубокое исследования уже известных, требует разработки новых методов и инструментов.
Ознакомиться с ними можно на международной выставке «Химия» или «Здравоохранение», которую проводит ЦВК «Экспоцентр».
Лабораторные методы исследования
В диагностике инфекционных болезней одну из ведущих позиций занимает лабораторная диагностика. Она включает следующие виды исследований:
Кроме идентификации вида возбудителя, эти методы позволяют оценить тяжесть состояния больных, следить за развитием болезни, а также осуществлять контроль над процессом лечения (параллельно с УЗИ диагностикой). Для успешного решения этих задач можно сдать анализы в Мытищах (в Медицинском центре Исида).
Бактериологические способы диагностики
Бактериологическое исследование проводится путем культивирования возбудителя инфекции на питательных средах. Материалом для его проведения могут быть различные биологические субстраты, такие как:
Методика позволяет определять вид инфекционного агента и получать о нем дополнительную информацию: серологический вариант и чувствительность к антибиотикам, а также степень обсеменения лабораторного материала (количество возбудителя в единице объема). Для обеспечения чистоты анализов, забор материала и его доставка должны проводиться с соблюдением всех правил, исключающих загрязнение.
В современной бактериологии также широко используются бактериоскопическая и паразитоскопическая методики, позволяющие с помощью микроскопии распознать возбудителя в более короткие сроки. Метод, в отличие от бактериологического (требующего длительного времени для роста и размножения микроорганизмов) дает возможность идентифицировать их в течение получаса.
Микроскопические исследования используют для диагностики разных видов бактериальных агентов: кокков, спирохет и палочек, в том числе, туберкулезной. Кроме этого, микроскопия широко применяется для выявления протозойных инфекций – малярии, амебиаза, лямблиоза, и гельминтозов, являясь основой их диагностики.
Кроме стандартных бактериоскопических исследований, существуют способы выявления возбудителей инфекционных болезней с использованием специфических флуоресцирующих сывороток. Эти методики, получившие название иммунофлуоресцентных, позволяют обнаруживать также и вирусы.
Серологическая и иммунохимическая диагностика
Методики основываются на выявлении в крови специфических антител к инфекционным агентам. Наиболее широко в лабораторной практике используются реакции агглютинации (РА), непрямой гемагглютинации (РНГА), а также торможения гемагглютинации (РТГА). Диагностика вирусов осуществляется с использованием реакций связывания комплемента (РСК), нейтрализации (РН) и преципитации в геле (РПГ), а также иммуноферментного (ИФА) и радиоиммунного анализа (РИА).
При проведении таких исследований диагностическими критериями являются высокие значения титров антител либо их нарастание. Всесторонне изучив анализ крови, (Мытищи предлагают различные виды гематологических исследований в клинике Исида), врач получит максимум необходимой информации.
Наиболее известными и широко распространенными методиками являются кожные пробы, содержащие аллергены инфекционных болезней, среди которых бруцеллез, токсоплазмоз, орнитоз и пр. Применяются также и более сложные исследования: реакции торможения миграции лейкоцитов, повреждения нейтрофилов и другие.
Биохимические методы
Данные методы являются менее специфичными в сравнении с вышеописанными, однако, они также имеют важное диагностическое значение. Они позволяют оценить функциональное состояние многих органов (печени, поджелудочной железы, почек), а также степень произошедших в них нарушений. Лабораторная служба Медицинского центра Исида выполняет такие анализы (Мытищи предлагают более 20-ти видов исследований).
Копрологические исследования
Метод позволяет судить о состоянии пищеварительного тракта – активности пищеварительных и кишечных желез, присутствии воспалительных процессов и их характере, а также помогает выявить наличие кишечных инфекций и глистных инвазий.
Все виды анализов проводятся по рекомендациям врача, конкретный перечень назначений зависит от многих факторов и определяется индивидуально.